非飞行性小型兽类多样性监测技术规范

小型兽类多数是生态系统中的初级和次级消费者，它们主要以植物的种子、花、果实、根茎等为食，同时也捕食一些无脊椎动物，它们更是许多捕食者(鸟类、大中型兽类、爬行类)的猎物。除此之外，小型兽类在生态系统中的角色还包括真菌孢子和植物种子的传播者及多种体表与体内寄生虫的宿主。因此在生态系统维持和发展中发挥着重要的作用。在兽类监测中对不同生态系统中小型兽类的调查有助于全面了解生态系统多样性构成以及系统健康发展机制，为开展兽类资源保护、濒危物种适应策略、致危过程和机制的研究提供多样化和层次化的数据资料。

参考中华人民共和国农业行业标准《农区鼠害监测技术规范》（NY/T 1481—2007），兽类网对非飞行性小型兽类多样性监测技术规范进行了编写，监测内容包括在各野外调查点进行动物标本采集、数量调查与登记，组织样品采集与保存，生态环境及危害调查，图片拍摄等。室内进行标本鉴定、制作，DNA条形码制作、数据录入、报告撰写等。监测原始记录确保完整、字迹规整，使用普通铅笔（HB）或黑色墨水笔记录，不得涂改，如记录有误可在错误的地方划线，再将正确的内容注在旁边。监测结果涉及的相关实质性文件和数据需按规范整理、提交、归档。同时鉴于目前生物安全需求，监测过程中需要遵循相关的安全卫生原则。

1 监测目的

非飞行性小型兽类是生态系统中链接生产者以及更高营养级消费者的中间桥梁，且许多物种显示生态工程师的作用或具有关键种功能。此外，有些物种是许多人畜共患疾病的病原微生物和媒介宿主，在开展其物种多样性监测时，可联合专业设备和实验平台开展病原微生物的同步监测与调查。通过样方或夹夜法等对其进行长期规范化监测，可以掌握其地理分布等基础资源信息，也可以了解其局域种群或群落构成，数量季节消长和年际动态等，相关数据为生物多样性保护以及相关危害风险管理提供基础数据。

2 适用范围

本规范规定了非飞行性小型兽类的监测对象、监测内容、指标、技术要求和数据收集管理方法。适用于科研院所、大专院校、自然保护地、野生动物保护管理机构、生态监测专业机构等开展科学研究、资源调查、生态环境监测、疫源物种的防控监测、生物多样性评估和保护管理成效评估等工作。

3 术语和定义

（1）样方法（ quadrat sampling method ）  指在被调查种群的生存环境内随机选取若干个样方，通过计数每个样方内的物种数和个体数，以所有样方物种推断监测区域物种数，以所有样方物种种群密度的平均值作为该物种种群的种群密度。通常可通过标志重捕技术获得物种数和个体数。

（2）夹夜法（trap-at-night method）  指将一定数量的鼠夹布放在样地，一个能够捕打到鼠类的鼠夹，其踏板感量在1.5~2.5 g的可有效使用的鼠夹，按规定的方式在样地置放一夜称为一个夹夜。通常布夹方法为每50个鼠夹为一夹线，沿直线布放，夹距5 m。与其平行间隔50 m布放另一条夹线，依次布放多条夹线，特殊地形可适当调整夹距。每次布放的夹线数不少于3条，连续布放2~3 d。

（3）有效夹数（effective traps）  指夹夜法监测过程中布夹总数减去无效夹数后的布夹数。

（4）夹捕率（trapping rate）  也称捕获率，指夹夜法监测中描述物种种群相对密度时的指标，即单位有效夹数所捕获的监测目标个体数，通常以100夹为标准即百夹捕获率。

（5）非损伤性取样法（noninvasive sampling method）   指观测者在不伤害物种本身的情况下，通过收集其毛发、粪便、尿液、咽拭子和肛拭子，用于个体分子生物学鉴定、个体生理状态或携带病原体的监测。

（6）动物标本（animal specimens）      指采取物理或化学手段，对动物整体或部分进行制作处理，用于长期保存，为新种发表提供实物证据,为系统进化、生物多样性及濒危物种保护等研究提供分子材料样本。通常的动物标本制作方法有浸制和剥制两大类。

4 监测对象与监测内容

主要监测对象为个体较小、种类多的非飞行性小型兽类，包括地栖性啮齿目、食虫目物种，多样性监测指标体系见表1。物种鉴定分类检索可参考国内相应目物种分类鉴定经典文献和专著。

表1 非飞行兽类多样性监测指标体系

5 监测工具及技术参数要求

采样工具主要包括鼠夹（贵溪李氏鼠夹厂大号）和鼠笼（20~28 cm×11~14 cm×11~14 cm），圆形塑料桶 (高24.0 cm，上口和桶底的直径分别为 22.5 cm 和 17.2 cm)，鼠布袋（白色30×20 cm），手持卫星定位导航仪。

6 监测方法与步骤

以兽类网成员单位所管理的整个保护区或生态区为样区。根据海拔、植被和人类活动干扰强度来确定监测样地的数量。基于样区网格化基础信息，设置监测样地，每个监测样地的面积至少 1 hm²（100 m×100 m）。每个海拔梯度或植被类型设置 3个监测样地作为重复。监测样方之间间距应大于 200 m以上。

啮齿目主要通过笼捕或夹捕进行调查；食虫目主要以陷阱辅以虾笼、鼹鼠并结合笼捕或夹捕进行调查。对监测采集到的动物活体样本，首先进行物种鉴定和形态学信息测定，并采用耳标或注射体内条码标签来进行标记，以区分重捕个体，测定记录必要的形态学信息，原地释放。如需必要解剖信息的活体，按捕获的死亡个体规程处理，带回实验室，编号测定相关个体形态、解剖信息和组织样品保存备用，样本野外现场捡取、实验室内处理及保存运输规范详见拓展阅读1。 然后选择一定数量样本制作浸制标本或选头骨皮毛完整具代表性的个体作假剥制凭证标本。现场监测以工作小组进行指定一人作为本监测方案的负责人（联系人），重点落实监测技术标准是否达标，组织野外布设小组按监测方案实施，并全权负责监测数据管理等。小组的数量根据监测样地数量来确定。

拓展阅读1：野外样本现场捡取、实验室处理及保存、运输规范

拓展阅读2：动物标本的制作

6.1 啮齿目多样性监测方法

（1）样方法  每个监测样地设置笼（夹）、陷井点 49 个（7×7）（图1），间距 15 m，均匀布设在每个监测样地，以布设点为中心，在半径 3 m 范围内寻找合适的点分别安放 1 笼和 1 夹。可根据需要对鼠笼、鼠夹位置作适当调整，每一样地连捕 2~3 d。调查中，当日下午布设鼠笼、鼠夹，次日上午检查动物进笼或夹捕情况。检查所有鼠笼，激发而未捕获鼠或诱饵丢失的鼠笼更换诱饵并原地重新布放，计数有效笼、捕获鼠情况填入表2。必要捕获样本带回实验室做后续信息采集和标本制作（详见拓展阅读1和拓展阅读2）。

图1 啮齿目多样性监测样地陷阱设置示意
○鼠笼、鼠夹安放点； ★陷阱设置点，同时安放鼠笼、鼠夹

（2）夹夜法  在野外调查时将一定数量的鼠夹布放在样地捕鼠的方法。一个有效使用（指能够捕打到鼠类的鼠夹，其踏板感量在1.5~2.5 g）的鼠夹，按规定的方式在样地置放一夜为一个夹夜。以生花生仁、葵花籽或者新鲜胡萝卜块作诱饵，用大号（150 mm×80 mm）或中号（120 mm×65 mm）木板夹或铁板夹，布夹方法为每50个鼠夹为一夹线，沿直线布放，夹距5 m。与其平行间隔50 m（如有障碍物可根据情况大于50 m）布放另一条夹线，依次布放多条夹线，特殊地形可适当调整夹距。每次布放的夹线数不少于3条，连续布放2~3 d，保证每一样地夹夜数600个以上。夹夜法检测中常会因以下原因产生无效夹：即①不明原因击发没有捕获鼠类的鼠夹；②捕获鸟类、蛙类等小型兽类以外的鼠夹；③诱饵丢失但没有击发的鼠夹；④击发但鼠夹上只有少量鼠毛，小段鼠尾和鼠爪的鼠夹；⑤遗失的鼠夹数。为了减少无效鼠夹的数量，在布放鼠夹时，敏感度要适当。敏感度太低，诱饵被吃后可能还不击发，敏感度太高，可能稍有震动就使鼠夹击发，都会增加无效夹的数量。同时，在外环境布放鼠夹时尽量不要布放在空旷地带，最好置于草丛下面，并在早晨尽早收夹，避免鸟类取食，造成无效夹。调查中，当日下午布设鼠笼、鼠夹，次日上午检查动物进笼或夹捕情况。检查所有鼠夹，激发而未捕获鼠或诱饵丢失的鼠夹或鼠笼更换诱饵并原地重新布放，计数有效夹、捕获鼠情况填入表2。必要捕获样本带回实验室做后续信息采集和标本制作（详见拓展阅读1和拓展阅读2）。

（3）营地下生活鼠种的调查方法  若调查点有营地下生活的啮齿类动物，动物样本采集可采用地箭法或鼠笼法，打开动物活动的土丘，在活动洞道设置地箭或专业捕鼠笼捕鼠。

种群数量可采用土丘密度法进行鼠密度测定。土丘密度法指通过计算新土丘密度指示鼢鼠类地下啮齿动物种群相对密度的方法。

本数据采集，样方面积不得小于0.25 hm²。为保障结果更真实反应地下啮齿动物真实密度，土丘密度法测定的时间必须在每年的4—5月及9—10月进行。数据记录与地上鼠类调查相同。必要捕获样本带回实验室做后续信息采集和标本制作（详见拓展阅读1和拓展阅读2）。

6.2 食虫目多样性监测方法

每个监测样地采用样方法布设陷阱为 9 个（3×3）（图2），陷阱为 一个圆形塑料桶 (高 24.0 cm，上口和桶底的直径分别为 22.5 cm 和 17.2 cm)。均匀布设在每个监测样地，陷阱间距为 25 m。尽量选择在枯倒木边缘布设陷阱，使桶上口缘略低于地面，并用泥土填充周围空隙以及用枯叶覆盖周围新土以保持原有状态，桶内加水 4~5 cm，以防止捕获物逃离或动物之间相互残杀。如果监测样地内有溪流经过，使用带锁口功能的虾蒌捕捉水生食虫目动物；如果监测样地内有明显的鼹鼠通道，使用鼹鼠夹捕捉地下生活的食虫目动物。每日下午布设陷阱，次日上午检查动物进陷情况，连捕3 d。对捕获的情况填入表2。必要捕获样本带回实验室做后续信息采集和标本制作（详见拓展阅读1和拓展阅读2）。

图2 食虫目多样性监测样地陷阱设置示意

7 监测时间及频次

用 1~2 年时间完成整个样区小型兽类本底资源清查工作。每隔 5~10 年进行一次（如遇重大自然灾害年份，灾后进行一次补测），并可依此方案建立常态监测方案，每年在旱季（春季：低密度； 秋季：高密度）对所设样地进行两次调查。

8 数据管理

8.1 监测样本编号原则

由于每个采样地点调查人员不同，编号可能造成重复，给后续工作带来麻烦，因此，每个采样地点要有唯一的代码，样本编码、剥制标本、头骨标本要一致且唯一，组织样本编码在样本编码基础上附加组织代码即可。

编码原则如下：

（1）地点编号  3位，字母+地区代码+样方或样线号码。

（2）时间编号  4位数字，年份最后数字+月份最后数字。

（3）动物编号  1～3位数字，每次每个采样地点从1开始。

示例：D012108001， D(地区)01（样方）21（年份）08（月份）001（样本号）。

（4）器官组织样品编号  在样本编号后面加上汉语拼音首字母如肝G，脾P，肺F，肾S，鼠耳E，气管Q，肠道C，胃内容物N、胸肌J、鼠耳E。写在管盖第二排数字后面。

（5）鼠体寄生物编号  蜱用字母T，其他寄生虫放在同一管中，用字母M即可。

示例：D012108001G; D(地区)01（样方）21（年份） 08（月份）001（样本号）G（肝组织样品）。

8.2 监测信息采集和记录

（1）环境信息  样地行政或生态区划、经纬度、海拔、植被和地形特征等（表2）。可利用当地气象台(站)资料。根据需要记录温度、降水、灾害天气等。

（2）物种和数量信息  小型兽类的种类、捕获率(%)、调查面积和土丘数（针对地下鼠）填入表2。记录现场放收鼠夹的时间、地点、经纬度（每个布放鼠夹/鼠笼地点中间位置的经纬度）、生境，夹、笼布放，无效和有效夹数，捕获动物数，由于现场记录的鼠数量可能存在错误，统计分析时参考解剖数据核查。

其中： 。

无效夹包括：①不明原因击发没有捕获鼠类的鼠夹；②捕获鸟类、蛙类等小型兽类以外的鼠夹；③诱饵丢失但没有击发的鼠夹；④击发但鼠夹上只有少量鼠毛，小段鼠尾和鼠爪的鼠夹；⑤遗失的鼠夹数。

（3）动物形态信息  指标测度可参考拓展阅读1和拓展阅读2，填入表3。在鉴定、采集体表寄生虫和解剖时记录鼠的种类、测量值、生理状态、寄生虫数量、解剖情况等。其时间、地点、生境应与表2保持一致。

（4）动物的解剖信息  指标测度可参考拓展阅读1，填入表4。进行成幼鉴定、胴体重，生殖器官测定。其捕获个体编号，时间、地点等应与表3保持一致。

（5）动物的 DNA条形码信息  按本规程捕获的每一个样本，取样本尾尖、耳尖或肌肉样本，浸泡于对应编号的2 mL冻存管内75%乙醇溶液中，于-20℃保存用于后续DNA条形码信息测定。

8.3 监测数据记载归档及上报

监测数据由专人负责管理和分析，数据回收一月内录入Excel，建立数据档案。注意：每次数据采集结束需要整理如下数据清单（并形成电子数据表）。

8.4 公共卫生安全规则

（1）选择样地之前，要与当地疾控部门沟通，了解当地人兽传染疫病流行情况，选择当年未发现疫病流行的地点作为调查样地。以避免兽传疾病风险。禁止接触野外非正常死亡的动物

（2）调查人员在操作时应穿经过消毒处理的防蚤衣、防蚤袜、戴手套和工作帽。戴N95医用口罩，禁止吸烟、喝酒、饮食，操作结束后必须用肥皂洗手、洗脸、清水漱口，及时清洗防护用品。人员应以身体健康的中、青年为宜。其他防护规范参考拓展阅读1。

（3）凡直接接触鼠的仪器、设备、工具均为专用，使用前后均应用医用乙醇、新洁尔灭等浸泡、清洗。接触样本工作结束时，先消毒手套或脱掉外层手套再进行其他操作。鼠类鉴定、解剖场所在完成工作后喷洒拟除虫菊酯类类杀虫剂，消灭环境中可能遗留的鼠体寄生虫。

（4）处理后的剩余鼠体放入塑料袋中，按相关生物安全要求，经高压后按实验室垃圾处理，如无上述条件，鼠尸喷洒消毒剂，野外深埋或在疾控中心焚烧等无害化处理，不可随意丢弃。

（5）组织标本运输时应遵守《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒）种或样本运输管理规定》和《人间传染的病原微生物名录》，避免对人员和环境造成污染。

9 标本制作

动物包括头骨的标本（也称研究标本或教学标本）是其形态学研究和分类鉴定的重要资料。个体或头骨和皮张都有的标本才可以作为鉴定种类的直接证据。按规程原则要求每一样地获得的完整小型兽类动物个体，每个物种挑选至少2雌2雄成体制作成个体浸制标本或附带完整头骨的假剥制标本或生态标本。具体的标本制作见拓展阅读2。

10 小型动物捕捉涉及的动物福利问题

在小型动物捕捉活体数量调查过程中，标记动物要采用电子标签，舍弃传统的剪趾标记，需要集中测量相关形态数据时，确保动物正常充足的饮水和食物，测量时可采用CO₂或异氟烷微量麻醉，测量完毕后及时放回样地。需要解剖和获取内脏等组织样品时，活体需要麻醉处死后进行操作。陷阱和标志重捕活体调查过程中要及时查看，防止间隔过长导致的意外死亡。夹布工具挑选合适，避免不合适导致的触发不能快速致死产生的长时间痛苦与恐惧。

参考文献

1.     郑智民, 姜志宽, 陈安国. 啮齿动物学[M].  上海：上海交通大学出版社, 2012.

2.     Smith AT, 解焱. 中国兽类野外手册[M]. 长沙: 湖南教育出版社, 2009.

3.     Krebs CJ. Ecological methodology [M]. 2nd ed. New York: Addison-Wesley, 1999.

4.     Kunz HT, Parsons S. Ecological and behavioral methods for the study of bats [M]. 2nd ed. Baltimore (Maryland): Johns Hopkins University Press, 2009.

表2 小型兽类监测野外现场信息记录表

调查人:                         联系电话:                   填表日期:    

表3 小型兽类监测个体鉴定、形态信息及体表寄生虫记录表

注：                                                                           填表人：                 第      页

表4 小型兽类监测个体解剖记录表

注：备注中注明组织采集情况、标本情况等信息。                                    填表人：                 第